Fenilgalaktoz CAS:2818-58-8

Enzim aktivitesi üzerindeki etkisi: Fenilgalaktosid, β-galaktosidaz enziminin aktivitesini ölçmek için yaygın olarak kullanılır.Fenilgalaktosid, β-galaktosidaz tarafından hidrolize edildiğinde p-nitrofenol açığa çıkar.P-nitrofenol birikimi niceliksel olarak ölçülebilir ve bu da β-galaktosidazın aktivitesine ilişkin bilgiler sağlar.Bu etki, enzim analizleri ve tarama sistemleri gibi uygulamalarda kullanılmaktadır.

Gen ekspresyonu analizi: Fenilgalaktosid, gen ekspresyonunu incelemek için moleküler biyoloji deneylerinde sıklıkla bir substrat olarak kullanılır.β-galaktosidazı kodlayan lacZ geni genellikle diğer ilgili genlerin düzenleyici dizileriyle birleştirilir.LacZ geninin ekspresyonu ve fenilgalaktosidin p-galaktosidaz tarafından hidrolizi, üzerinde çalışılan hedef genin ekspresyon modelini ve seviyesini gösterebilir.

Tarama sistemleri: Fenilgalaktosid, β-galaktosidaz aktivitesinden yararlanan tarama sistemlerinin önemli bir bileşenidir.Yaygın olarak bilinen bir örnek, moleküler biyoloji deneylerinde rekombinant veya dönüştürülmüş hücreleri tanımlamak için kullanılan mavi-beyaz tarama yöntemidir.Rekombinant DNA'yı başarılı bir şekilde almış veya genetik rekombinasyona uğramış koloniler, β-galaktosidazı eksprese edecek ve bu da fenilgalaktosidin hidrolizine ve mavi bir rengin oluşmasına yol açacaktır.

Protein saflaştırması: Bazı durumlarda fenilgalaktosid, β-galaktosidaza spesifik olarak bağlanan veya onun tarafından aktive edilen proteinleri saflaştırmak amacıyla afinite kromatografisi için bir ligand olarak kullanılabilir.İlgili protein bir afinite etiketine veya bir p-galaktosidaz bağlama alanını içeren bir füzyon etiketine sahip olabilir.Protein karışımının hareketsizleştirilmiş fenilgalaktosid içeren bir kolondan geçirilmesiyle istenen protein seçici olarak tutulabilir ve daha sonra elüe edilebilir.