IPTG CAS:367-93-1 Üretici Fiyatı
İzopropil β-D-1-tiogalaktopiranosid (IPTG), moleküler biyoloji araştırmalarında ve biyoteknoloji uygulamalarında yaygın olarak kullanılan sentetik bir laktoz analoğudur.IPTG öncelikle bakteriyel sistemlerde genlerin ekspresyonunu indüklemek için kullanılır; burada hedef genlerin transkripsiyonunu başlatmak için moleküler bir tetikleyici görevi görür.
Büyüme ortamına eklendiğinde IPTG, bakteriler tarafından alınır ve lac baskılayıcı proteine bağlanarak lac operonunun aktivitesini bloke etmesini önleyebilir.Lak operonu, laktoz metabolizmasında yer alan bir gen kümesidir ve baskılayıcı protein çıkarıldığında genler ifade edilir.
IPTG sıklıkla lac promotörünün yapısal olarak aktif bir versiyonu olan lacUV5 mutant promotörü ile birlikte kullanılır.Araştırmacılar, IPTG indüksiyonunu bu mutant promoterle birleştirerek yüksek düzeyde gen ekspresyonu elde edebilirler.Bu, saflaştırma veya diğer alt uygulamalar için büyük miktarlarda protein üretimine olanak tanır.
Gen ekspresyonuna ek olarak IPTG, mavi/beyaz tarama analizlerinde de sıklıkla kullanılır.Bu teknikte, lacZ geni tipik olarak ilgili gene kaynaştırılır ve bu füzyon genini başarıyla ifade eden bakteriler, aktif bir β-galaktosidaz enzimi üretecektir.IPTG, X-gal gibi kromojenik bir substratla birlikte eklendiğinde, füzyon genini eksprese eden bakteriler, β-galaktosidaz aktivitesi nedeniyle maviye döner.Bu, ilgili geni başarılı bir şekilde entegre eden rekombinant suşların tanımlanmasına ve seçilmesine olanak tanır.
Gen ekspresyonunun indüksiyonu: IPTG, bakteriyel sistemlerde hedef genlerin ekspresyonunu indüklemek için yaygın olarak kullanılır.Doğal indükleyici laktozu taklit eder ve lac baskılayıcı proteine bağlanarak onun lac operonunu bloke etmesini önler.Bu, istenen genlerin transkripsiyonunu ve ekspresyonunu sağlar.
Protein ekspresyonu ve saflaştırılması: IPTG indüksiyonu sıklıkla biyokimyasal çalışmalar, terapötik üretim veya yapısal analiz gibi çeşitli amaçlar için büyük miktarlarda rekombinant protein üretmek için kullanılır.Araştırmacılar, uygun ekspresyon vektörlerini ve IPTG indüksiyonunu kullanarak bakteriyel konakçılarda yüksek düzeyde hedef protein üretimi elde edebilirler.
Mavi/beyaz tarama: IPTG, mavi/beyaz tarama analizleri için sıklıkla lacZ geni ve X-gal gibi kromojenik bir substrat ile kombinasyon halinde kullanılır.LacZ geni tipik olarak ilgilenilen gene bağlanır ve bu füzyon genini başarılı bir şekilde ifade eden bakteriler aktif bir β-galaktosidaz enzimi üretecektir.IPTG ve kromojenik substrat eklendiğinde, füzyon genini eksprese eden rekombinant suşlar maviye dönerek kolay tanımlama ve seçime olanak tanır.
Gen düzenlemesinin incelenmesi: IPTG indüksiyonu, genlerin ve operonların, özellikle de lac operonunun düzenlenmesini incelemek için yapılan araştırmalarda yaygın olarak kullanılır.Araştırmacılar, IPTG konsantrasyonlarını değiştirerek ve lac operon bileşenlerinin ifadesini izleyerek, gen düzenleme mekanizmalarını ve çeşitli faktörlerin veya mutasyonların rolünü araştırabilirler.
Gen ekspresyon sistemleri: IPTG, T7 promotör bazlı sistemler gibi çeşitli gen ekspresyon sistemlerinde önemli bir bileşendir.Bu sistemlerde lac promotörü sıklıkla T7 RNA polimerazın ekspresyonunu yönlendirmek için kullanılır, bu da hedef genleri T7 promotör dizilerinin kontrolü altında kopyalar.IPTG, hedef gen ekspresyonunun aktivasyonuna yol açan T7 RNA polimerazın ekspresyonunu indüklemek için kullanılır.
Kompozisyon | C9H18O5S |
tahlil | %99 |
Dış görünüş | Beyaz toz |
CAS Numarası. | 367-93-1 |
Paketleme | Küçük ve toplu |
Raf ömrü | 2 yıl |
Depolamak | Serin ve kuru alanda saklayın |
Sertifikasyon | ISO. |